ComplementTech C3 (concentrated)說明書

一般描述

濃縮C3主要是因?yàn)檠逯蠧3的正常濃度高（約1.2mg / ml），因此重構(gòu)耗竭血清需要高濃度的該補(bǔ)體蛋白。  天然人C3是含有兩個(gè)二硫鍵連接的鏈的天然糖基化（?2.7％）多肽。  C3對補(bǔ)體激活的所有三種途徑的激活至關(guān)重要（Law，SKA和Reid，KBM（1995））。  每個(gè)途徑的啟動(dòng)產(chǎn)生與目標(biāo)表面結(jié)合的蛋白水解酶復(fù)合物（C3轉(zhuǎn)化酶）。  這些酶切割C3中的肽鍵釋放過敏毒素 C3a并激活C3b。  在短時(shí)間內(nèi)（?60μs），這種新生C3b能夠與目標(biāo)表面上的羥基反應(yīng)并共價(jià)偶聯(lián)。  碳水化合物是的目標(biāo)，但蛋白質(zhì)羥基和氨基也會(huì)發(fā)生反應(yīng)。  用C3b標(biāo)記目標(biāo)表面的過程稱為調(diào)理作用。  新生C3b中的反應(yīng)性位點(diǎn)是硫酯（Tack BJ等（1980）; Pangburn MK和Müller-Eberhard HJ（1980）），C3b通過共價(jià)酯鍵連接到靶上（如果形成酰胺鍵，則形成C3b與氨基連接）。  補(bǔ)體激活過程中激活的大多數(shù)C3不會(huì)附著在表面上，因?yàn)樗牧蝓ヅc水反應(yīng)形成液相C3b，液相C3b由因子H和I迅速失活而形成iC3b。  表面結(jié)合的C3b在所有三種途徑中都是必需的，以有效激活C5和形成裂解靶細(xì)胞膜的C5b-9復(fù)合物。  表面結(jié)合的C3b及其分解產(chǎn)物iC3b和C3d被淋巴和吞噬細(xì)胞上的許多受體識別，所述淋巴和吞噬細(xì)胞使用C3b 配體刺激抗原呈遞至適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的細(xì)胞。  終的結(jié)果是目標(biāo)特異性B細(xì)胞和T細(xì)胞種群的擴(kuò)大。

物理特性和結(jié)構(gòu)

分子量：  185,000道爾頓，由兩個(gè)二硫鍵連接組成。  α鏈?zhǔn)?10,000道爾頓（含有C3a和C3d結(jié)構(gòu)域），β鏈?zhǔn)?5,000道爾頓。  α和β鏈通過單個(gè)二硫鍵連接。C3   的等電位約為。5.9

在C3轉(zhuǎn)化酶切割C3后，從α鏈的N端釋放C3a（77個(gè)氨基酸片段，9083Da），并且C3b（176,000Da）共價(jià)連接至活化劑表面。  已經(jīng)描述了C3和C3b的晶體衍生的結(jié)構(gòu)（Gros，P。（2008）），并且這些顯示C3a-C3b肽鍵斷裂后在C3的C3b部分發(fā)生大的構(gòu)象變化。 

            天然C3和C4在血漿中循環(huán)，分子內(nèi) 硫酯鍵連接C3d或C4d結(jié)構(gòu)域中的甘氨酸和谷氨酰胺殘基。  這些硫酯鍵容易受到胺（例如氨，甲胺，羥胺和肼）的親核攻擊，所有這些都被用于使血清中的補(bǔ)體失活。 

            CAS號碼：  80295-41-6

MDL編號：  MFCD00130836       

功能

            C3對于有效補(bǔ)體活化和隨后將抗原遞呈至適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的細(xì)胞是*的（Lambris，JD（1988））。  識別目標(biāo)后，補(bǔ)體被三條補(bǔ)體途徑之一激活，酶（C3轉(zhuǎn)化酶）在靶表面形成。  這些酶（C4b ，C2a 或C3b，Bb）在α鏈的精氨酸 77釋放過敏毒素 C3a并將C3b沉積在靶表面上后切割C3 。  雖然有一個(gè)非常薄弱的C3旁路系統(tǒng)，通過經(jīng)典和凝集素途徑（C4b ，C2a可以以C3b，C4b，C2a的大約1/2000的比率以約1/2000的比率激活C5而不具有C3b），C3b對于有效的C5激活是必需的（Rawal N.和Pangburn MK（2003））。

            純化的C4對凍融極其敏感，在每個(gè)凍融循環(huán)中凍結(jié)/融化損失5-10％的活性。  這也是中間溫度如-20敏感^? C.   的時(shí)間越長其保持在中間溫度越活性喪失。  在-20幾個(gè)小時(shí)^? C能*滅活它，即使它仍然*凍結(jié)。

名稱：C3蛋白濃縮           C3 Protein Concentrated           

目錄號：      A113c

提供的大小：          1000微克/瓶

濃度：           5.0 mg / mL （見實(shí)際濃度分析證書）

形式：                          冷凍液體

活性：                      與正常人血清標(biāo)準(zhǔn)相比> 70％（見分析證書）。

純度： 通過SDS-PAGE> 95％                       

緩沖液：                        10mM磷酸鈉，145mM NaCl，pH7.2

滅絕 科夫。        阿 _280 納米=  1.03以1.0毫克/毫升

分子量：     185,000Da（2鏈）

防腐劑：              無，0.22μm過濾

存儲：                      -70 ^ò C或以下。  避免凍結(jié)/解凍（每次解凍> 10％的活性損失）。

資源：                       正常 人血清（通過認(rèn)證測試顯示為陰性

對于 HBsAg，HTLV-I / II，STS以及針對HCV，HIV-1和HIV-II的抗體）。

預(yù)防措施：               使用正常的預(yù)防措施處理人體血液制品。

產(chǎn)地：                        制造在美國。

測定

            補(bǔ)充激活需要C3。  因此，C3功能的典型測定使用缺乏C3的系統(tǒng)中的細(xì)胞裂解終點(diǎn)，除了來自被測定的來源。  有三種基本測定。  1）抗體致敏的綿羊紅細(xì)胞（EA）可用于使用貧C3的人血清的CH50型分析。  該測定的靈敏度約為50ng C3。  2）EA和純化組分C1，C4和C2可用于制備利用C3進(jìn)行有效C5激活和裂解的EAC142細(xì)胞（Dodds，AW和Sim，RB（1997））。   該測定的靈敏度約為5ng C3。  3）可以使用替代性途徑測定法，其在5mM MgEGTA存在下使用兔紅細(xì)胞和貧C3人血清。  該測定的靈敏度約為200ng C3。

體內(nèi)

            血清濃度為1.0至1.5mg / mL，平均1.2mg / mL，這使得C3成為血液中豐富的補(bǔ)體蛋白。  它代表約。血液中總蛋白的2.5％，不包括白蛋白和免疫球蛋白，是血漿中蛋白質(zhì)的?8％。  合成的主要部位是肝，但是C3也可以在巨噬細(xì)胞，嗜中性粒細(xì)胞， 星形膠質(zhì)細(xì)胞以及身體許多組織中的內(nèi)皮和上皮細(xì)胞中產(chǎn)生。

規(guī)

            C3的生物合成在IL-1，IL-6，TNF-α和LPS合成C3的大多數(shù)細(xì)胞中上調(diào)。嗜中性粒細(xì)胞被 IL-1和IFN-γ 下調(diào)   

遺傳學(xué)

            人類染色體定位19p13.3-p13.2。小鼠染色體定位染色體17和大鼠染色體9.登錄號K02765（人）和K02782（小鼠）。人類基因組結(jié)構(gòu)：該基因跨越41kb和41個(gè)外顯子      

不足之處

             完整的人C3缺陷很少見，但已發(fā)現(xiàn)一些病例。重要的是，患有這種疾病的成年人雖然因免疫力受損而存在高風(fēng)險(xiǎn)，但未必是致命的。  一個(gè)充分表征的2歲兒童缺陷的病例表明，該缺陷與復(fù)發(fā)性化膿性感染，樹突細(xì)胞分化受損，獲得B細(xì)胞記憶能力受損和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞發(fā)育不足有關(guān)。  疫苗接種僅產(chǎn)生小的短期抗體應(yīng)答（Ghannam A等，（2008））。  其他人類病例和許多動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭С诌@些結(jié)論（Singer，L等人，（1994））。  這些免疫系統(tǒng)缺陷與C3缺陷的關(guān)聯(lián)強(qiáng)烈支持C3在先天性和適應(yīng)性免疫應(yīng)答中的主要作用。

            C3的缺乏還導(dǎo)致不能調(diào)理細(xì)菌，導(dǎo)致吞噬作用降低，不能釋放C3a并且嚴(yán)重降低產(chǎn)生C和C5b的能力，這損害了終端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9的生成。 

疾病

            The deposition of C3, that is, the attachment of C3b to microorganisms or host tissues is the hallmark of complement activation at inflammatory sites.  Many diseases exhibit histochemically identifiable C3b deposits as part of their pathology, or at least as markers of pathology (Law, S.K.A. and Reid, K.B.M. (1995); Ross, G.D. (1986)).  These diseases include ischemia/reperfusion events such as heart attacks and strokes and bacterial, viral, parasitic and fungal infections.  Antibody-mediated autoimmune diseases such as systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, and autoimmune hemolytic anemia are characterized by C3b deposition on tissues.   Even when the antibody response is not directed at the host complement can be 存款。  補(bǔ)體的主要功能是幫助巨噬細(xì)胞吞噬系統(tǒng)清除循環(huán)免疫復(fù)合物。  高水平的復(fù)合物可能壓倒該系統(tǒng)，導(dǎo)致補(bǔ)體和免疫復(fù)合物在組織和腎中沉積，導(dǎo)致腎小球腎炎，致密沉積疾病和關(guān)節(jié)炎。  增加或減少補(bǔ)體活性的C3變體與諸如年齡相關(guān)性黃斑變性的疾病有關(guān)。  C3沉積物還在疾病中表現(xiàn)出信號補(bǔ)體激活，例如陣發(fā)性夜間血紅蛋白尿，遺傳性溶血性尿毒癥綜合征，移植排斥和炎性皮膚病如血管性水腫。

注意事項(xiàng)/毒性/危險(xiǎn)

            這種蛋白質(zhì)的來源是人血清，因此必須使用適合處理任何血源性產(chǎn)品的預(yù)防措施，盡管來源通過認(rèn)證測試顯示HBsAg，HTLV-I / II，STS陰性，HCV抗體，HIV-1和HIV-II。

            危險(xiǎn)代碼：B            WGK德國 3

            MSDS可根據(jù)要求提供。